Supplementation action with ascorbic acid in the morphology of the muscular layer and reactive acetylcholinesterase neurons of ileum of mdx mice.

The Duchenne Muscular Dystrophy (DMD) is a genetic disorder characterized by the absence of dystrophin protein, causing severe myopathy from increases of oxidative stress. Injuries of intestinal muscle can compromise the myenteric plexus. This study aimed to evaluate the disorders occurred in the muscular layer and in the acetylcholinesterase myenteric neurons (ACHE-r) of ileum of mdx mice, and the effects of supplementation with ascorbic acid (AA) in both components. 30 male mice C57BL/10, and 30 male mice C57BL/10Mdx were separated according to the age and treatment (n=10/group): 30-days-old control group (C30); 30-days-old dystrophic group (D30); 60-days-old control group (C60); 60-days-old dystrophic group (D60); 60-days-old control group supplemented with AA (CS60); and 60-days-old dystrophic group supplemented with AA (DS60). The animals were euthanized and the ileum was collected and processed. Semi-serial sections were stained by Masson's trichrome, and acetylcholinesterase histochemical technique in whole-mounts preparations to identify the myenteric neurons. The muscular layer thickness and the area of smooth muscle of ileum were lower in dystrophic groups, especially in D30 group. The DS60 group showed the muscular layer thickness similar to C60. The density of ACHE-r neurons of myenteric plexus of ileum was lower in D30 animals; however, it was similar in animals of 60-days-old without treatment (C60 and D60) and, higher in DS60. The cell body profile area of ACHE-r neurons was similar in C30-D30 and C60-D60; however, it was higher in DS60. DMD caused damage to the ileum's musculature and myenteric plexus, and the AA prevented the ACHE-r neuronal loss.

Efeito da atividade física moderada sobre neurônios mioentéricos nitrérgicos do íleo de ratos de meia idade / The effect of moderate physical activity on myoenteric nitrergic neurons in the ileum of middle-aged rats / Efecto de la actividad física moderada en neuronas mientéricas nitrérgicas del íleon de ratas de mediana edad

Poucos são os relatos a respeito do efeito da atividade física sobre o plexo mioentérico ao longo do envelhecimento. Portanto, analisaram-se os neurônios mioentéricos NADPH-diaforase positivos do íleo em ratos que envelheceram praticando atividade física a partir dos seis meses de vida. Dez ratos Wistar foram distribuídos em dois grupos (n = 5/grupo): S (ratos sedentários controles com 12 meses de idade) e T (ratos treinados com 12 meses de idade). Os animais do grupo T realizaram, dos seis aos 12 meses de idade, atividade física regulada conforme resultados obtidos em teste de esforço máximo. Ao final do período experimental, o íleo obtido de cada animal foi processado para a técnica de NADPH-diaforase para evidenciar neurônios mioentéricos em preparados de membrana e quantificar e mensurar a área do pericário desses neurônios. A área do pericário não diferiu (P> 0,05) entre o grupo S (218,49 µm2) e o grupo T (210,59 µm2). A média de neurônios presente em 60 campos microscópicos de preparados de membranas no grupo S (126 neurônios) foi superior (P<0,05) a média encontrada no grupo T (93 neurônios), sugerindo que a atividade física pode inibir ou diminuir a expressão dos neurônios nitrérgicos em ratos de 12 meses de idade que praticaram atividade física desde os seis meses de vida. Os resultados quantitativos sugerem que a falta de atividade física regular propicia aumento na atividade dos neurônios nitrérgicos, contribuindo para o surgimento dos distúrbios da motricidade gastrointestinal que podem ocorrer ao longo do envelhecimento.

There are only a few reports on the effect of physical activity in the myoenteric plexus throughout the aging process. For such, the positive myoenteric NADPH-diaphoresis neurons in the ileum of those rats that aged practicing physical activity from the sixth month were analyzed. Ten Wistar rats were distributed into two groups (n= 5/group): S (12 months-old control sedentary rats) and T (12 months-old trained rats). The animals from the T group practiced controlled physical activity from the age of 6 months to 12 months, according to the maximum effort test results. At the end of the experimental period, the ileum obtained from each animal was processed in the NADPH-diaphoresis technique to highlight myoenteric neurons in membrane preparations, and quantify and measure the perikaryon area from those neurons. The Perikaryon area did not differ (P>0.05) among the S group (218.49 µm2) and the T group (210.59 µm2). The average of neurons in 60 membrane preparations in the S group (126 neurons) was higher (P<0.05) than the average finding in the T group (93 neurons), indicating that the physical activity can inhibit or decrease the nitrergic expression in 12 month-old rats that have practiced physical activity from the age of 6 months. The quantitative results suggest that the lack of regular physical activity provides the elevation of nitrergic neurons, concurring to the emergence of gastrointestinal motility disorders that can occur during the aging process.

Hay pocos informes sobre el efecto de la actividad física sobre el plexo mientérico a lo largo del envejecimiento. Por lo tanto, se analizaron las neuronas mientéricas NADPH-diaforasa positivas del íleon en ratas que envejecieron practicando actividad física a partir de seis meses de vida. Diez ratas Wistar se dividieron en dos grupos (n = 5 / grupo): S (ratas sedentarias de control con 12 meses de edad) y T (ratas entrenadas con 12 meses de edad). Los animales del grupo T realizaron, de los seis a los doce meses de edad, actividad física regulada conforme resultados obtenidos en prueba de esfuerzo máximo. Al final del período experimental, el íleon obtenido de cada animal se procesó por la técnica de NADPH-diaforasa para mostrar las neuronas mientéricas en preparados de membrana, cuantificar y medir el área del pericario de esas neuronas. El área del pericario no difirió (P> 0.05) entre el grupo S (218.49 µm2) y el grupo T (210.59 µm2). El número medio de neuronas presentes en 60 campos microscópicos de preparados de membranas en el grupo S (126 neuronas) fue mayor (P <0,05), promedio encontrado en el grupo T (93 neuronas), lo que sugiere que la actividad física puede inhibir o disminuir la expresión de las neuronas nitrérgicas en ratas de 12 meses de edad que practicaron actividad física desde los seis meses de edad. Los resultados cuantitativos sugieren que la falta de actividad física regular promueve aumento en la actividad de las neuronas nitrérgicas, contribuyendo a la aparición de disturbios de la motricidad gastrointestinal que pueden ocurrir a lo largo del envejecimiento.

Efeitos da suplementação com ácido ascórbico sore os neurônios mioentéricos doo estômago de ratos diabeticos / Effcts of ascorbbic acid supplementation on myenterc neurons in thhe stomach of diabetic rats

Diabetes mellitus (DM) é uma desordem metabólica caracterizada pelo aumento nos níveis de glicose no sangue. O DM pode promover alterações degenerativas do sistema nervoso entérico, porque a hiperglicemia aumenta a formação de espécies reativas de oxigênio e, consequentemente, aumenta o estresse oxidativo. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da suplementação com ácido ascórbico (AA) nos neurônios NADH-diaforase reativos (NADH-dr) do plexo mioentérico do estômago de ratos com diabetes induzida por estreptozootocina. Para tanto, 15 animais foram divididos em três grupos (n = 5): Grupo C (ratos normoglicêmicos), Grupo D (ratos diabéticos) e DS Grupo (ratos diabéticos tratados com ácido ascórbico). A técnica histoquímica da NADH-diaforase foi empregada e, a densidade neuronal (neurónios/mm2) e a área do perfil dos corpos celulares de 500 neurônios NADH-d de todos os grupos foi investigada. A densidade neuronal no grupo DS foi maior do que nos grupos C (P> 0,05) e D (P <0,05). A área dos neurônios mioentéricos (NADH-dr) foi menor nos grupos C (P <0,05) e DS (P> 0,05) que o grupo D. Estes resultados sugerem que a suplementação com ascórbico promoveu um efeito neuroprotetor nos NADH-dr neurônios mioentéricos do estômago dos ratos diabéticos.

Diabetes mellitus (DM) is a metabolic disorder characterized by an increase in blood glucose levels. DM can promote degenerative changes in the enteric nervous system due to the hyperglycemia increasing the formation of reactive oxygen species and, consequently increasing the oxidative stress. The aim of this study was to evaluate the effect of ascorbic acid (AA) supplementation on the NADH-diaphorase reactive neurons (NADH-dr) in the myenteric plexus of the stomach of streptozotocin-induced diabetic rats. In order to do this, 15 animals were divided into three groups (n=5): C Group (normoglicemic rats), D Group (diabetic rats) and DS Group (diabetic rats treated with ascorbic acid). The NADH-d histochemistry technique was employed and the neuronal density (neurons/mm2) and the cell body profile area of 500 NADH-d-stained neurons from all groups were investigated. The neuronal density in the DS group was higher than in the C (P>0.05) and D (P<0.05) groups. The area of the (NADH-dr) myenteric neurons was smaller in the C (P<0.05) and DS (P>0.05) groups than in the D group. These results suggest that ascorbic supplementation promotes a neuroprotective effect on the NADH-drmyenteric neurons from the stomach of diabetic rats.

Participação dos nervos intercostais na inervação do diafragma de gatos (Felis catus, Linnaeus, 1758) / Innervation of diaphragm through intercostal nerves in cats (Felis catus, Linnaeus, 1758)

O objetivo do presente trabalho foi avaliar a inervação do músculo diafragma em gatos, proveniente dos nervos intercostais, contradizendo diversos autores que afirmam ser este músculo inervado apenas pelos ramos dos nervos frênicos direito e esquerdo. Foi observado que existe a frequência de nervos dispostos entre o 8º e o 11º espaços intercostais.

The knowledge of organism's anatomy is essential to conduct any experiment or study with itself. Based on that, we decided to analyze and study in details the innervation of the diaphragm muscle from intercostal nerves in cats. It goes beyond other authors' analysis that describes only the innervation from phrenic nerves. Despite we have got a range of results, we observed a major frequency of eighth to tenth intercostal nerves going to diaphragm muscle.

Estudo morfométrico dos neurônios do gânglio mesentérico caudal de cães durante o desenvolvimento pós-natal (maturação e envelhecimento) / Morphometric study of the neurons in the caudal mesenteric ganglion of the dogs during the post- natal development (maturation and aging)

O envelhecimento é caracterizado por um progressivo declínio na função neuronal envolvendo tanto o sistema nervoso central como o periférico. O aumento da idade é verificado por alterações no número e no tamanho dos neurônios. Contudo, estes dados são controversos e pouco conhecidos nos gânglios periféricos. Desta forma, o presente estudo teve como objetivo estudar o gânglio mesentérico caudal (GMC) de cães em dois períodos distintos do desenvolvimento (maturação e envelhecimento), a procura de alterações morfométricas nos neurônios. A importância do GMC esta ligada à inervação simpática do intestino grosso, esfíncter anal interno e parcialmente o aparelho urogenital. Para o estudo, foram utilizados nove cães domésticos sem raça definida e machos, divididos em três grupos etários com idades bem definidas (1-2 meses, 1-3 anos e 5-10 anos). Os gânglios foram processados para o estudo da microscopia e luz e as análises morfométricas (área seccional do neurônio e do núcleo) foram realizadas por meio do software de análise morfométrica KS 400 ZEISS®. O aumento da idade foi caracterizado por um aumento no tamanho do neurônio e do núcleo. Quanto a relação núcleo-citoplasma, esta diminuiu com o aumento da idade.

The aging is characterized by a progressive decline of neuronal function that involves both the central and the peripheral nervous system.Aging process is accompanied by changes in the number and size of neurons. However, these data are controvesial and poorly known in the peripheral ganglia. In this way, the present investigation aimed to study the dog's caudal mesenteric ganglion (CMG) in two different phases of aging (maturation and aging), looking for morphometric alterations in the neurons. The importance of the CMG is associated with the innervation of the lower large intestine, internal anal sphincter and partially the urogenital system. To the study, was used nine males, mongrel, domestic dogs, divided into three different well defined aged groups (1-2 months, 1-3 years old, 5-10 years old). The ganglia were processed for light microscopy study and the morphometric analyses were done using morphometric analyses software KS 400 Zeiss®. The increase of age was caractherized by an increased in size of neuron and nucleu. Concerning about nucleus-citoplasmic relation, this decrease with the age.

Postnatal-related changes in the size and total number of neurons in the caudal mesenteric ganglion of dogs: total number of neurons can be predicted from body weight and ganglion volume.

Aging is mostly characterized by a progressive decline of neuronal function that involves both the central and the peripheral nervous system. The aging process is accompanied by changes in either the number or the size of neurons. However, these data are controversial and not very well known in the sympathetic ganglia of large mammals. Hence, the present investigation aimed to study the dog's caudal mesenteric ganglion (CMG) in three different periods of postnatal development, searching for qualitative and quantitative alterations. The CMG is responsible for the large intestine, internal anal sphincter, and partially the urogenital system innervations. Nine dead male dogs from the Veterinary Hospital of the College of Veterinary Medicine at University of São Paulo were divided into three well-defined age groups (1-2 months old, 1-2 years old, and 5-10 years old). The stereological study was pursued using the physical disector method combined to the Cavalieri principle. The postnatal development was accompanied by an increase in the nonneuronal tissue amount and in ganglion volume. Additionally, the total number of neurons also increased during aging (from 70,140 to 1,204,516), although the neuronal density showed an opposite trend (from 29,911 to 11,500 mm(-3)). Due to the interrelation between either body weight or ganglion volume and aging in the dogs investigated in this study, it was possible to predict the total number of neurons in CMG using both body weight and ganglion volume in an attempt to verify whether or not size and total number of neurons are both allometrically and aging ruled, i.e., if either the animal's body weight and ganglion volume or aging influence these parameters. The prediction of the total number of neurons was very close to the initially estimated values.

Avaliação quantitativa e mofométrica dos neurônios mioentéricos da região agrandular do estômago de ratos com Diabetes Mellitus induzido por estreptozootocina e suplementados com ácido ascórbico / Quantitative and morphometric evaluation of myenteric neurons of the forestomach of streptozotocin-induced diabetic rats supplemented with ascorbic acid

O presente trabalho teve como objetivos investigar possíveis alterações no número e a área do corpo celular dos neurônios mioentéricos NADH-diaforase reativos (NADH-dr) da região aglandular do estômago de ratos diabéticos e o efeito da suplementação com AA (1g/L de água) nos referidos parâmetros. Para tanto, 15 ratos (Rattus norvegicus) foram separados em três grupos (n = 5): controle (C); diabético (D); e diabético suplementado com AA (DS). O DM foi induzido por estreptozootocina (35 mg/kg de peso corporal). Após 120 dias de experimento, os animais foram anestesiados para obtenção do estômago. Os neurônios mioentéricos foram evidenciados pelo método da NADH-diaforase. Por meio de microscópio de luz foram contados os neurônios NADH-dr e, pelo programa computadorizado para análise de imagens, foi mensurado o perfil do corpo celular (PCC) desses neurônios. O número de neurônios NADH-dr não variou significativamente entre os três grupos estutados (P>0,05). A média dos PCCs foi maior (P<0,05) para os neurônios dos grupos D e DS do que para o grupo C. Ocorreu aumento na incidência de neurônios com PCC superior a 200 µm2 no grupo D quando comparada aos grupos DS e C. Os resultados sugerem que a suplementação com AA teve efeito neuroprotetor sobre os neurônios mioentéricos NADH-dr representado pela diminuição da freqüência de neurônios grandes na região aglandular A e B do grupo DS